世界を駆け巡る考古学者にして型破りな冒険家。 幼い頃から歴史や遺跡の研究を続け、発見・発掘した秘宝は“人類すべての遺産”として博物館に収めることが正しいと考えている。大学教授として考古学を教えてきたが、本作では遂に引退。親友の娘ヘレナが現れたことで、人生をかけて探し求めた究極の秘宝《運命のダイヤル》をめぐる新たな冒険へと巻き込まれていく。好奇心旺盛で、ロマンチストな皮肉屋。

抜群の知性と行動力で秘宝を追うトレーダー。 インディの朋友バジルの娘で名付け親はインディ。父の教育もあり、古代言語や歴史に精通している。その父が追い続けてきた《運命のダイヤル》の行方を探してインディの前に現れる。

冷酷な物理学者で悪名高きインディの宿敵。 元ナチスという過去を持つ物理学者。表向きは別名を名乗り、米国政府の巨大プロジェクトにも参加している。第二次世界大戦末期に《運命のダイヤル》の一部を発見するが、インディ・ジョーンズとの出会いによってダイヤルを奪われ、その奪還に残りの人生を費やしてきた。

インディの窮地に必ず現れる親友。 かつては故郷エジプトで発掘屋をしており、インディの聖櫃（アーク）発掘を手助けした。スエズ危機を機にアメリカに移住。子だくさんで家族想い。

インディの旧友で頼れる潜水士。 スペイン最高の潜水士でもあり、自分の船を持ち仲間たちと航行する日々。

インディを追う謎の捜査官。 鋭い眼光でインディとヘレナを執拗に追い続ける。その目的は謎に包まれている。

インディの長年の親友でヘレナの父親。 オックスフォード大学の考古学教授。娘のヘレナが幼い頃から古代言語や歴史を教え込む。インディからは“バズ”と呼ばれ、第二次世界大戦の末期タッグを組み、《運命のダイヤル》をはじめとするナチスが強奪した秘宝や歴史的資料の奪還に尽力していた。

インディの冒険を手助けする予測不能な少年。ヘレナの相棒で、モロッコで暮らす。飛行機で空を飛ぶことを夢見て日夜イメトレ中。スリの腕前はピカイチ。相手の隙をつき素早く忍び込むなど優れた身体能力を持つが、泳ぎはできない。